Содержание

Что такое цоликлоны? Как с их помощью определить группу крови и резус-фактор

Цоликлоны – моноклинальные антитела, которые были получены из крови мышей с помощью генной инженерии и используются для определения группы крови системы АВО и резус-фактора.

Цоликлоны, в противовес стандартным сывороткам, отличаются высокой активностью и авидностью (временем наступления, а также выраженностью склеивания (реакции агглютинации).

Основные цоликлоны:

  • Анти-A;
  • Анти-B;
  • Анти-AB;
  • Анти-0 и т.д.

По цоликлонам определяют резус-фактор и группы крови.

Содержание статьи

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Определение данным методом производится в лабораторных условиях. Температура воздуха должна находиться в пределах +15 – + 25 градусов по Цельсию. Исследование должно проводиться при достаточно хорошем освещении.

Реагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител.

Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Анализ проводится на белой тарелке или планшете с хорошо смачиваемой поверхностью. Благодаря высокой активности и авидности цоликлонов, есть возможно применение по серии реагентов анти-A и анти-B.

На планшете нужно сделать надписи с названиям антигенов анти-A/анти-B. Далее снизу от соответствующих надписей капают примерно 0,1 миллилитр цоликлонов. У реагента анти-A цвет желтовато-розовый, у анти-B – синий.

Определение групп крови

Возле моноклональных антител капают по одной капле крови, смешивают ее уголком предметного стекла или стеклянной палочкой с реагентами. Перед дальнейшим смешиванием пар капель необходимо тщательно промыть и насухо вытереть стекло или палочку.

Наблюдение за процессом агглютинацией ведут в течение 2,5 минут, при этом тарелку или планшет нужно слегка покачивать

. По истечении времени оценивают результат. Стоит отметить, что наблюдения за агглютинацией не требуют каких-либо специальных приспособлений.

Агглютинаты достаточно хорошо видны даже невооруженным глазом, быстро сливаясь и образуя большие хлопья. В случае, если не происходит склеивания, капля реагента приобретает равномерную окраску красного цвета.

Расшифровка результатов

Таблица сопоставления группы крови и цоликлона позволяет разобраться в результатах.

Цоликлон I положительная I отрицательная II положительная II отрицательная III положительная III отрицательная IV положительная IV отрицательная
Анти-А + + + +
Анти-В + + + +
Анти-D + + + +
  1. Если отсутствует агглютинация (с анти-A и анти-B), эритроциты не содержат антигенов A и Б. Это I группа крови;
  2. Если есть агглютинация только с анти-A, эритроциты содержат лишь антиген A, что характеризует II группу крови;
  3. Если агглютинация только с анти-B, красные клетки содержат антиген B, что характеризует III группу;
  4. Если наблюдается агглютинация c обоими цоликлонамми анти-A и анти-B, эритроциты содержат оба антигена. С целью исключения аутоагглютинации необходимо провести контрольную процедуру: в этом случае смешивают 0,1 миллилитр изотонического раствора хлорида натрия и 0,01 миллилитр исследуемой крови. Если реакция агглютинации отсутствует, определяется IV группа.
Расшифровка результатов

Определение резус-фактора

Для определения резус-фактора наносят на планшет большую каплю анти-D-супе, возле нее – маленькую каплю (меньше в десять раз) исследуемой крови. Производят смешивание и оценивают полученный результат. Если реакция агглютинации началась, данная методика определяет кровь как резус-положительную, если резус-фактор отрицательный – агглютинации нет.

Определение резус-фактора

Препараты цоликлонов

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D.

Существуют три разновидности:

  • Обычный анти-D-цоликлон. При его добавлении развивается реакция непрямой агглютинации;
  • Супер. Вызывает прямую агглютинацию;
  • Препарат анти-D-микс, имеющий в составе компоненты обычного и супер цоликлона анти-D). С их помощью можно как выявить группу крови, так и определить резус-принадлежность крови.

Отличие других растворов состоит в названии, поскольку входящие в их состав антитела – иммуноглобулины М и G – предоставляют возможность только произвести типизацию крови по антигенам АВ0. Различие заключается исключительно в механизме слипания эритроцитов (агглютинация прямая/непрямая).

У каждого из этих препаратов есть свои собственные особенности использования и срок годности. Однако наибольшей популярностью в лабораторной клинической диагностике пользуются только 3 вышеуказанных препарата (анти-А, анти-В, анти-D).

Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа

Иногда возможно получение недостоверных, ложных результатов. К примеру, если при добавлении к препарату крови изменился их цвет или если агглютинация наблюдается во всех ячейках планшетки.

Чтобы предотвратить такие результаты, если выполняется определение группы цоликлонами, алгоритм действий предусматривает определенные правила. Сначала следует посмотреть на срок обращения цоликлонов. Недопустимо использовать реагенты, у которых истек срок годности.

Обязательно нужно соблюдать и все условия правильного проведения процедуры. Помещение должно иметь хорошо оборудованное рабочее место с температурным режимом и достаточным освещением. Если инструкция к препарату содержит указания и касательно требуемой влажности, следует учитывать и данный фактор.

Немалое значение имеет и чистота планшетки, так как ее загрязнение может привести к возникновению ошибок в исследовании и, как следствие, к получению неверных результатов.

Где можно провести анализ?

Определение группы цоликлонами постепенно приобретает все большую популярность. Если раньше эта процедура проводилась исключительно в специализированных стационарах (к примеру, только в отделениях гематологии и хирургии), то сейчас процедура доступна почти в любой достаточно оборудованной лаборатории.

Методика цоликлонов находит применение и в поликлиниках. Там ее включают различные методы экспресс-определения группы крови, проводимые с целью скорейшего выставления пациенту диагноза.

На платной основе проведение этой услуги предлагают и многие центры косметологии и частной медицины. Бесплатно данная процедура, как было сказано выше, проводится по направлению терапевта или лечащего врача.

Если отсутствует возможность обратиться за анализом крови в поликлинику, исследование можно провести и самостоятельно при наличии набора препаратов и специальной планшетки.

Однако необходимо помнить, что для получения достоверных результатов требуется соблюдать условия процедуры, в особенности это касается стерильности.

Видео

Цоликлоны что такое — Здоровье феникса

ЦоликлоныЦоликлоныЦоликлоны – моноклинальные антитела, которые были получены из крови мышей с помощью генной инженерии и используются для определения группы крови системы АВО и резус-фактора.

Цоликлоны, в противовес стандартным сывороткам, отличаются высокой активностью и авидностью (временем наступления, а также выраженностью склеивания (реакции агглютинации).

Основные цоликлоны:

  • Анти-A;
  • Анти-B;
  • Анти-AB;
  • Анти-0 и т.д.

По цоликлонам определяют резус-фактор и группы крови.

Содержание статьи:

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Определение данным методом производится в лабораторных условиях. Температура воздуха должна находиться в пределах +15 – + 25 градусов по Цельсию. Исследование должно проводиться при достаточно хорошем освещении.

реагенты

реагентыРеагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител. Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Анализ проводится на белой тарелке или планшете с хорошо смачиваемой поверхностью. Благодаря высокой активности и авидности цоликлонов, есть возможно применение по серии реагентов анти-A и анти-B.

На планшете нужно сделать надписи с названиям антигенов анти-A/анти-B. Далее снизу от соответствующих надписей капают примерно 0,1 миллилитр цоликлонов. У реагента анти-A цвет желтовато-розовый, у анти-B – синий.

Определение групп кровиОпределение групп кровиОпределение групп крови

Возле моноклональных антител капают по одной капле крови, смешивают ее уголком предметного стекла или стеклянной палочкой с реагентами. Перед дальнейшим смешиванием пар капель необходимо тщательно промыть и насухо вытереть стекло или палочку.

Наблюдение за процессом агглютинацией ведут в течение 2,5 минут, при этом тарелку или планшет нужно слегка покачивать. По истечении времени оценивают результат. Стоит отметить, что наблюдения за агглютинацией не требуют каких-либо специальных приспособлений.

Агглютинаты достаточно хорошо видны даже невооруженным глазом, быстро сливаясь и образуя большие хлопья. В случае, если не происходит склеивания, капля реагента приобретает равномерную окраску красного цвета.

Расшифровка результатов

Таблица сопоставления группы крови и цоликлона позволяет разобраться в результатах.

Цоликлон I положительная I отрицательная II положительная II отрицательная III положительная III отрицательная IV положительная IV отрицательная
Анти-А + + + +
Анти-В + + + +
Анти-D + + + +
  1. Если отсутствует агглютинация (с анти-A и анти-B), эритроциты не содержат антигенов A и Б. Это I группа крови;
  2. Если есть агглютинация только с анти-A, эритроциты содержат лишь антиген A, что характеризует II группу крови;
  3. Если агглютинация только с анти-B, красные клетки содержат антиген B, что характеризует III группу;
  4. Если наблюдается агглютинация c обоими цоликлонамми анти-A и анти-B, эритроциты содержат оба антигена. С целью исключения аутоагглютинации необходимо провести контрольную процедуру: в этом случае смешивают 0,1 миллилитр изотонического раствора хлорида натрия и 0,01 миллилитр исследуемой крови. Если реакция агглютинации отсутствует, определяется IV группа.
Расшифровка результатовРасшифровка результатовРасшифровка результатов

Определение резус-фактора

Для определения резус-фактора наносят на планшет большую каплю анти-D-супе, возле нее – маленькую каплю (меньше в десять раз) исследуемой крови. Производят смешивание и оценивают полученный результат. Если реакция агглютинации началась, данная методика определяет кровь как резус-положительную, если резус-фактор отрицательный – агглютинации нет.

Определение резус-фактораОпределение резус-фактораОпределение резус-фактора

Препараты цоликлонов

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D.

Существуют три разновидности:

  • анти-D-цоликлонанти-D-цоликлонОбычный анти-D-цоликлон. При его добавлении развивается реакция непрямой агглютинации;
  • Супер. Вызывает прямую агглютинацию;
  • Препарат анти-D-микс, имеющий в составе компоненты обычного и супер цоликлона анти-D). С их помощью можно как выявить группу крови, так и определить резус-принадлежность крови.

Отличие других растворов состоит в названии, поскольку входящие в их состав антитела – иммуноглобулины М и G – предоставляют возможность только произвести типизацию крови по антигенам АВ0. Различие заключается исключительно в механизме слипания эритроцитов (агглютинация прямая/непрямая).

У каждого из этих препаратов есть свои собственные особенности использования и срок годности. Однако наибольшей популярностью в лабораторной клинической диагностике пользуются только 3 вышеуказанных препарата (анти-А, анти-В, анти-D).

Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа

Иногда возможно получение недостоверных, ложных результатов. К примеру, если при добавлении к препарату крови изменился их цвет или если агглютинация наблюдается во всех ячейках планшетки.

Чтобы предотвратить такие результаты, если выполняется определение группы цоликлонами, алгоритм действий предусматривает определенные правила. Сначала следует посмотреть на срок обращения цоликлонов. Недопустимо использовать реагенты, у которых истек срок годности.

планшетка

планшеткаОбязательно нужно соблюдать и все условия правильного проведения процедуры. Помещение должно иметь хорошо оборудованное рабочее место с температурным режимом и достаточным освещением. Если инструкция к препарату содержит указания и касательно требуемой влажности, следует учитывать и данный фактор.

Немалое значение имеет и чистота планшетки, так как ее загрязнение может привести к возникновению ошибок в исследовании и, как следствие, к получению неверных результатов.

Где можно провести анализ?

Определение группы цоликлонами постепенно приобретает все большую популярность. Если раньше эта процедура проводилась исключительно в специализированных стационарах (к примеру, только в отделениях гематологии и хирургии), то сейчас процедура доступна почти в любой достаточно оборудованной лаборатории.

Методика цоликлонов находит применение и в поликлиниках. Там ее включают различные методы экспресс-определения группы крови, проводимые с целью скорейшего выставления пациенту диагноза.

На платной основе проведение этой услуги предлагают и многие центры косметологии и частной медицины. Бесплатно данная процедура, как было сказано выше, проводится по направлению терапевта или лечащего врача.

проведение анализапроведение анализаЕсли отсутствует возможность обратиться за анализом крови в поликлинику, исследование можно провести и самостоятельно при наличии набора препаратов и специальной планшетки. Однако необходимо помнить, что для получения достоверных результатов требуется соблюдать условия процедуры, в особенности это касается стерильности.

Видео



Source: moyakrov.info

Читайте также

Что такое цоликлоны? Как с их помощью определить группу крови и резус-фактор

Цоликлоны – моноклинальные антитела, которые были получены из крови мышей с помощью генной инженерии и используются для определения группы крови системы АВО и резус-фактора.

Цоликлоны, в противовес стандартным сывороткам, отличаются высокой активностью и авидностью (временем наступления, а также выраженностью склеивания (реакции агглютинации).

Основные цоликлоны:

  • Анти-A,
  • Анти-B,
  • Анти-AB,
  • Анти-0 и т.д.

По цоликлонам определяют резус-фактор и группы крови.

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Определение данным методом производится в лабораторных условиях. Температура воздуха должна находиться в пределах +15 – + 25 градусов по Цельсию. Исследование должно проводиться при достаточно хорошем освещении.

Реагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител.

Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Анализ проводится на белой тарелке или планшете с хорошо смачиваемой поверхностью. Благодаря высокой активности и авидности цоликлонов, есть возможно применение по серии реагентов анти-A и анти-B.

На планшете нужно сделать надписи с названиям антигенов анти-A/анти-B. Далее снизу от соответствующих надписей капают примерно 0,1 миллилитр цоликлонов. У реагента анти-A цвет желтовато-розовый, у анти-B – синий.

Определение групп крови

Возле моноклональных антител капают по одной капле крови, смешивают ее уголком предметного стекла или стеклянной палочкой с реагентами. Перед дальнейшим смешиванием пар капель необходимо тщательно промыть и насухо вытереть стекло или палочку.

Наблюдение за процессом агглютинацией ведут в течение 2,5 минут, при этом тарелку или планшет нужно слегка покачивать. По истечении времени оценивают результат. Стоит отметить, что наблюдения за агглютинацией не требуют каких-либо специальных приспособлений.

Агглютинаты достаточно хорошо видны даже невооруженным глазом, быстро сливаясь и образуя большие хлопья. В случае, если не происходит склеивания, капля реагента приобретает равномерную окраску красного цвета.

Расшифровка результатов

Таблица сопоставления группы крови и цоликлона позволяет разобраться в результатах.

Цоликлон I положительная I отрицательная II положительная II отрицательная III положительная III отрицательная IV положительная IV отрицательная

Анти-А + + + +
Анти-В + + + +
Анти-D + + + +
  • Если отсутствует агглютинация (с анти-A и анти-B), эритроциты не содержат антигенов A и Б. Это I группа крови,
  • Если есть агглютинация только с анти-A, эритроциты содержат лишь антиген A, что характеризует II группу крови,
  • Если агглютинация только с анти-B, красные клетки содержат антиген B, что характеризует III группу,
  • Если наблюдается агглютинация c обоими цоликлонамми анти-A и анти-B, эритроциты содержат оба антигена. С целью исключения аутоагглютинации необходимо провести контрольную процедуру: в этом случае смешивают 0,1 миллилитр изотонического раствора хлорида натрия и 0,01 миллилитр исследуемой крови. Если реакция агглютинации отсутствует, определяется IV группа.

Расшифровка результатов

Определение резус-фактора

Для определения резус-фактора наносят на планшет большую каплю анти-D-супе, возле нее – маленькую каплю (меньше в десять раз) исследуемой крови. Производят смешивание и оценивают полученный результат. Если реакция агглютинации началась, данная методика определяет кровь как резус-положительную, если резус-фактор отрицательный – агглютинации нет.

Определение резус-фактора

Препараты цоликлонов

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D.

Существуют три разновидности:

  • Обычный анти-D-цоликлон. При его добавлении развивается реакция непрямой агглютинации,
  • Супер. Вызывает прямую агглютинацию,
  • Препарат анти-D-микс, имеющий в составе компоненты обычного и супер цоликлона анти-D). С их помощью можно как выявить группу крови, так и определить резус-принадлежность крови.

Отличие других растворов состоит в названии, поскольку входящие в их состав антитела – иммуноглобулины М и G – предоставляют возможность только произвести типизацию крови по антигенам АВ0. Различие заключается исключительно в механизме слипания эритроцитов (агглютинация прямая/непрямая).

У каждого из этих препаратов есть свои собственные особенности использования и срок годности. Однако наибольшей популярностью в лабораторной клинической диагностике пользуются только 3 вышеуказанных препарата (анти-А, анти-В, анти-D).

Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа

Иногда возможно получение недостоверных, ложных результатов. К примеру, если при добавлении к препарату крови изменился их цвет или если агглютинация наблюдается во всех ячейках планшетки.

Чтобы предотвратить такие результаты, если выполняется определение группы цоликлонами, алгоритм действий предусматривает определенные правила. Сначала следует посмотреть на срок обращения цоликлонов. Недопустимо использовать реагенты, у которых истек срок годности.

Обязательно нужно соблюдать и все условия правильного проведения процедуры. Помещение должно иметь хорошо оборудованное рабочее место с температурным режимом и достаточным освещением. Если инструкция к препарату содержит указания и касательно требуемой влажности, следует учитывать и данный фактор.

Немалое значение имеет и чистота планшетки, так как ее загрязнение может привести к возникновению ошибок в исследовании и, как следствие, к получению неверных результатов.

Где можно провести анализ?

Определение группы цоликлонами постепенно приобретает все большую популярность. Если раньше эта процедура проводилась исключительно в специализированных стационарах (к примеру, только в отделениях гематологии и хирургии), то сейчас процедура доступна почти в любой достаточно оборудованной лаборатории.

Методика цоликлонов находит применение и в поликлиниках. Там ее включают различные методы экспресс-определения группы крови, проводимые с целью скорейшего выставления пациенту диагноза.

На платной основе проведение этой услуги предлагают и многие центры косметологии и частной медицины. Бесплатно данная процедура, как было сказано выше, проводится по направлению терапевта или лечащего врача.

Если отсутствует возможность обратиться за анализом крови в поликлинику, исследование можно провести и самостоятельно при наличии набора препаратов и специальной планшетки. Однако необходимо помнить, что для получения достоверных результатов требуется соблюдать условия процедуры, в особенности это касается стерильности.

Видео

Алгоритм определения группы крови цоликлонами ‹ MED-Q.ru

Содержание статьи

Веками ученые пытались узнать о человеческом организме как можно больше и научиться исцелять больных от любой болезни. Одним из важных параметров является определение группы крови цоликлонами. Медицина выделяет у людей всего четыре группы крови не зависимо от половой или расовой принадлежности. Иммунологические признаки, которые и составляют основное различие по группе эритроцитарных антигенов, передаются по наследству.

Что такое цоликлон

Определение группы крови с помощью различных лабораторных реагентов стандартный метод исследований. Информация группе крови крайне важна, особенно в тех случаях, когда человеку нужна экстренная помощь. Перед хирургическим вмешательством обязательно определяется тип индивидуальных антигенных характеристик человека. Та же процедура является обязательно для военнослужащих (информация указывается на форме), для женщин перед родами и т.д.

Определение групп крови цоликлонами сравнительно новый метод исследования. Этот анализ может проводиться на любом этапе стационарного лечения пациентов.

Для осуществления лабораторного исследования не требуется много времени, достаточно наличие всех необходимых химических веществ (цоликлонов) и простого оборудования.

Цоликлоны по сути являются одним из видов иммуноглобулинов (тип М). Это моноклональные антитела, которые были образованы с помощью генной инженерии. Цоликлоны получены в результате воздействия сыворотки на стерильных лабораторных мышей. Образовывается скопление жидкости в брюшной полости грызуна, которая содержит эти антитела.

Подготовка к процедуре

Определение групп крови с помощью цоликлонов требует предварительной подготовки и действий согласно установленному алгоритму. Обстановка в помещении, в котором проводится анализ оговорена отдельно. Температура воздуха должна быть не ниже 15 и не выше 25 градусов, иначе результат исследования не может считаться достоверным. В помещении не должно быть пыли, животных, насекомых и других факторов, которые могут физически повлиять на процесс проведения исследования. Также проведение лабораторного анализа требует хорошей освещенности помещения.

При использовании цоликлонов важно держать флаконы плотно зарытыми и не допускать пересыхания реагентов, иначе способность антител к активным действиям заметно снижается. Перед процедурой подготавливается весь необходимый инвентарь. Для проведения анализа потребуется пробирка для биологического образца, планшет для нанесения реагентов, стерильные пипетки и палочки для взаимодействия с биологическими образцами.

Если лаборант проводит не только лабораторное исследование, но и забор крови, то необходимо подготовить одноразовые шприцы или вакуумные пробирки, жгут, медицинский спирт, ватные шарики и стерильные салфетки. Также под рукой должны быть инструменты для маркировки биообразов пациентов.

Проведения анализа

В современной лабораторной диагностике используется три вида стандартных цоликлонов для определения группы крови и резус фактора. Реагент типа «Анти-А» окрашен в красный цвет, также окрашен и флакон, колпачок или этикетка флакона». Тип «Анти-В» окрашивается синим, а «Анти АВ» не помечается цветным маркером. Производители реагентов выпускают упаковки с цоликлонами 5 или 10 мл. Не допускается использование испорченных или некачественных реагентов.

При наличии видимых дефектов упаковки или появлении хлопьев в жидкости, цоликлон не используют.

  • Для определения группы крови на специально подготовленную пластину, которая оформлена как таблица, наносят цоликлоны различных типов (А, В и АВ). Каждый из них должен быть подписан. Реагент наносится на специально отмеченную область. Каждый тип цоликлона должен наноситься отдельной стерильной пипеткой.
  • Рядом с реагентами помещается по 1 капле крови пациента.
  • Стерильной палочкой реагенты смешивают с биологическим образцом.
  • Уже спустя несколько секунд можно заметить изменения и происходящую реакцию агглютинации. По правилам наблюдение следует вести в течение 3 минут. После этого можно сделать вывод о результатах исследования.

Как понять результат

  • Отсутствие какой-либо реакции склеивания во всех образцах означает, что в клетках эритроцитов пациента нет агглютиногена исследуемого типа. Образец крови причисляется к I группе (тип 0).
  • Если эритроцитарные клетки пациента вступили в реакцию с реагентами типа «Анти-а» и «Анти-АВ», то у пациента II группа крови (тип А).
  • Заметная агглютинация образца исследуемой крови с цоликлонами тип «Анти-АВ» и «Анти-В» означает, что пациент обладает III группой крови (тип В).
  • Если кровь пациента вступила в реакцию со всеми химичсекими реагентами, то исследуемый образец принадлежит к IV группе (тип АВ). При определении группы крови с помощью цоликлонов дополнительной проверки не требуется, так как реагенты не содержат добавок, которые могут спровоцировать спонтанную реакцию.

Определение группы крови и резус фактора проводится в лабораторных учреждениях в медицинских учреждениях. Это достаточно простое исследование, которое дает очень полезную и жизненно важную информацию о человеке.

В будущем информация группы крови и резус фактора позволит быстро оказать помощь и организовать переливание крови после травмы или аварии и может спасти жизнь. Узнать свой номер ГК можно самостоятельно заказав исследование в любой медицинской лаборатории. Полученные данные необходимо внести в карту пациента.

Поделитесь с друзьями в соц.сетях

Facebook

Twitter

Google+

Telegram

Vkontakte

Что такое цоликлоны? -

Цоликлон — это солевой раствор моноклональных антител к антигенам эритроцитов человека.

Моноклональные антитела используют для определения группы крови. Для их получения применяют гибридомную технологию.

Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения групп крови человека системы АВО взамен стандартных изогем-агглютинирующих сывороток.

Цоликлоны анти-А и анти-В являются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы (опухоль костного мозга). Индивидуальные гибридомные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, которые полностью идентичны по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.

 

Справка о клональных антителах:

Культура клеток одной специфичности, происходящих из одного лимфоцита, образует клетки одного клона. Главное заключается в следующем: необходимо получить от одной клетки специфические антитела и наработать их в неограниченном количестве. Трудность заключается в преодолении двух задач: во-первых, нормальные клетки после нескольких делений погибают; во-вторых, только раковые клетки способны неограниченно размножаться. Для решения этих двух несовместимых проблем в 1975 году Г. Кёлер и К. Мильштейн создали клеточные гибриды, или гибридомы. Гибридомы — это слияние нормальных лимфоцитов в питательной среде с клетками миеломы. Лимфоциты в этой среде не погибают, а от миеломного партнера получают возможность бесконечно размножаться. Таким образом, гибридомный клан размножается, а в результате этого процесса образуются моноклональные антитела.
Лимфоциты, несущие агтлютиноген А, вырабатывают специфическое антитело анти-А; лимфоциты, несущие агтлютиноген В, вырабатывают специфическое антитело анти-В.

Моноклональные анти-А и анти-В антитела продуцируются двумя различными гибридомами. Цоликлоны анти-А и анти-В представляют собой разведенную асцитную жидкость мышей-носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины класса М (IgM), направленные против группоспецифических антигенов А или В человека.
Таким образом, цоликлоны не содержат антител иной специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов.

Авидность, то есть время наступления реакции агглютинации и ее выраженность, у цоликлонов анти-А и анти-В выше, чем у изогемагглютинирующих АВО-сывороток, особенно в случае слабо выраженных антигенов эритроцитов.

 

Цоликлоны используют в виде лиофилизированного порошка красного (анти-А) или синего (анти-В) цвета, порошок разводят изотоническим раствором натрия хлорида непосредственно перед исследованием.

 

Методика определения группы крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В:

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А и анти-В. Рядом с ними наносят по одной маленькой капле (0,01 мл) исследуемой крови. перемешивание составнях частей производят стеклянной палочкой или углом предметного стекла, которые промывают и досуха вытирают перед размешиванием каждой капли. Наблюдение за реакцией проводят при легком покачивании в течение не более 2,5 минуты. Положительный результат при определении группы крови проявляет себя агглютинацией (склеиванием) эритроцитов. При этом агглютинаты можно увидеть без каких-либо приспособлений в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся и образующих крупные хлопья.
При отрицательной реакции определения группы крови капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агтлютинаты в ней не обнаруживаются. Агглютинация, обычно, определяется в течении первых 3—5 секунд. Несмотря на это, наблюдение за результатами необходимо вести не меньше 2,5 минуты из-за возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

 

Похожие статьи:

Что такое цоликлоны? -

Цоликлон — это солевой раствор моноклональных антител к антигенам эритроцитов человека.

Моноклональные антитела используют для определения группы крови. Для их получения применяют гибридомную технологию.

Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения групп крови человека системы АВО взамен стандартных изогем-агглютинирующих сывороток.

Цоликлоны анти-А и анти-В являются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы (опухоль костного мозга). Индивидуальные гибридомные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, которые полностью идентичны по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.

 

Справка о клональных антителах:

Культура клеток одной специфичности, происходящих из одного лимфоцита, образует клетки одного клона. Главное заключается в следующем: необходимо получить от одной клетки специфические антитела и наработать их в неограниченном количестве. Трудность заключается в преодолении двух задач: во-первых, нормальные клетки после нескольких делений погибают; во-вторых, только раковые клетки способны неограниченно размножаться. Для решения этих двух несовместимых проблем в 1975 году Г. Кёлер и К. Мильштейн создали клеточные гибриды, или гибридомы. Гибридомы — это слияние нормальных лимфоцитов в питательной среде с клетками миеломы. Лимфоциты в этой среде не погибают, а от миеломного партнера получают возможность бесконечно размножаться. Таким образом, гибридомный клан размножается, а в результате этого процесса образуются моноклональные антитела.
Лимфоциты, несущие агтлютиноген А, вырабатывают специфическое антитело анти-А; лимфоциты, несущие агтлютиноген В, вырабатывают специфическое антитело анти-В.

Моноклональные анти-А и анти-В антитела продуцируются двумя различными гибридомами. Цоликлоны анти-А и анти-В представляют собой разведенную асцитную жидкость мышей-носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины класса М (IgM), направленные против группоспецифических антигенов А или В человека.
Таким образом, цоликлоны не содержат антител иной специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов.

Авидность, то есть время наступления реакции агглютинации и ее выраженность, у цоликлонов анти-А и анти-В выше, чем у изогемагглютинирующих АВО-сывороток, особенно в случае слабо выраженных антигенов эритроцитов.

 

Цоликлоны используют в виде лиофилизированного порошка красного (анти-А) или синего (анти-В) цвета, порошок разводят изотоническим раствором натрия хлорида непосредственно перед исследованием.

 

Методика определения группы крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В:

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А и анти-В. Рядом с ними наносят по одной маленькой капле (0,01 мл) исследуемой крови. перемешивание составнях частей производят стеклянной палочкой или углом предметного стекла, которые промывают и досуха вытирают перед размешиванием каждой капли. Наблюдение за реакцией проводят при легком покачивании в течение не более 2,5 минуты. Положительный результат при определении группы крови проявляет себя агглютинацией (склеиванием) эритроцитов. При этом агглютинаты можно увидеть без каких-либо приспособлений в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся и образующих крупные хлопья.
При отрицательной реакции определения группы крови капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агтлютинаты в ней не обнаруживаются. Агглютинация, обычно, определяется в течении первых 3—5 секунд. Несмотря на это, наблюдение за результатами необходимо вести не меньше 2,5 минуты из-за возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

 

Похожие статьи:

Узнаем что такое цоликлоны и для чего они нужны?

Определение группы крови — важное лабораторное исследование, которое показано людям перед любыми операциями, а также беременным, военным, водителям транспортных средств и другим группам лиц, которым в любое время может потребоваться переливание крови.

Существует много техник проведения этого анализа, но самым быстрым и простым способом считается определение группы крови с помощью цоликлонов.

Принцип действия цоликлонов

Цоликлоны — специальные реагенты для определения группы крови, которые были разработаны в Центральном Ордена Ленина Институте Переливания Крови в Москве (ЦОЛИПК), откуда и получили свое название. Их изобретение позволило отказаться от более сложного и времязатратного метода стандартных сывороток.

Для того, чтобы понять, как работают цоликлоны, необходимо знать, чем группы крови отличаются друг от друга. В основе их различия лежит наличие или отсутствие на поверхности эритроцитов особых веществ, называемых агглютиногенами.

Всего существует два типа агглютиногенов, которые обозначаются буквами A и B.

У людей с первой группой крови агглютиногенов нет вообще, поэтому ее обозначают цифрой 0. Вторая группа крови подразумевает наличие агглютиногена A и обозначается соответствующей буквой.

Подобным же образом присутствие агглютиногена B относит кровь к третьей (B) группе. Ну а если в крови человека содержатся сразу оба агглютиногена, то ее обозначают буквами AB и называют четвертой.

Именно на основе этой несложной схемы разработан принцип действия цоликлонов.

Цоликлоны — это жидкости, содержащие вещества, которые способны вступать в реакцию с тем или иным агглютиногеном и вызывать при этом свертывание исследуемой крови. Цоликлон, показывающий таким образом наличие агглютиногена A, называется Анти-A и имеет красный цвет.

Вторая жидкость, способная сворачивать кровь с агглютиногеном B, является цоликлоном Анти-B и имеет синюю окраску. Существует также бесцветный цоликлон Анти-AB, представляющий собой смесь Анти-A и Анти-B цоликлонов и необходимый в некоторых случаях для подтверждения полученного результата. Жидкости выпускаются в стеклянных флаконах либо в пластиковых с капельницей, что облегчает их использование.

Алгоритм действий при анализе

Для проведения анализа на группу крови с помощью цоликлонов понадобится только планшет (любая чистая плоская пластина достаточного размера, например, тарелка), цоликлоны и две капли крови.

Для проведения исследования подходит почти любая кровь: взятая в консервант или без консерванта, из вены или из пальца.

Прежде чем начать работу, нужно пометить на планшете, с какой стороны какой цоликлон будет нанесен, иначе есть риск спутать их результаты.

Затем необходимо нанести по одной большой капле каждого цоликлона (Анти-A обычно капают с левой стороны, а Анти-B — с правой). Далее к каждой капле добавляют по одной небольшой капле крови. Капля крови должна быть примерно в 10 раз меньше по размеру, чем капля цоликлона. После этого планшет нужно аккуратно покачать, чтобы жидкость и кровь перемешались, но так, чтобы разноименные цоликлоны не смешались между собой.

При наблюдении за результатом анализа в течение нескольких минут можно увидеть либо равномерное перемешивание крови и цоликлона, либо реакцию агглютинации, то есть склеивания эритроцитов и свертывания крови. В этом случае становится видно, как эритроциты сначала соединяются в мелкие комочки, а затем выпадают хлопьями. Остается только интерпретировать полученные результаты.

  1. Реакция агглютинации не произошла ни в одной из капель — определяется первая (0) группа крови
  2. Кровь свернулась только с цоликлоном Анти-A — на планшете вторая (A) группа
  3. Свертывание крови произошло в капле с Анти-B — мы исследовали кровь третьей (B) группы
  4. Эритроциты выпали в осадок при соприкосновении с обоими цоликлонами — мы имеем дело с четвертой (AB) группой крови.

Однако в этом случае следует подтвердить полученный результат двумя дополнительными пробами. Для начала каплю исследуемой крови смешивают с цоликлоном Анти-AB, произошедшая при этом реакция агглютинации подтвердит наличие агглютиногенов A и B в исследуемой крови.

Также следует исключить неспецифическое склеивание эритроцитов, которое проявляется в агглютинации кровяных телец в любом растворе и возникает при некоторых тяжелых заболеваниях. Для этого каплю крови смешивают с обычным физиологическим раствором натрия хлорида, отсутствие реакции подтвердит четвертую (AB) группу крови.

Важные моменты

Метод определения группы крови с помощью цоликлонов является достаточно точным. Неверные результаты анализа чаще всего бывают вызваны ошибками, допущенными при его проведении. Для того, чтобы избежать их, необходимо учитывать несколько важных моментов.

  1. Цоликлоны обязательно должны храниться в холодильнике при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия. Более того, вскрытый флакон можно хранить там только в течение месяца, плотно закрытым. При несоблюдении этого правила реагенты могут поменять свои свойства, поэтому нельзя использовать просроченные или неправильно хранившиеся цоликлоны.
  2. Анализ должен проводиться при хорошем освещении и температуре воздуха в помещении от 15 до 25 градусов. Если жаркая погода не позволяет соблюсти нужный температурный режим, то исследование необходимо провести на охлажденном планшете.
  3. Необходимо четко знать, в какой капле находится цоликлон Анти-A, а в какой — Анти-B, именно для этого планшет обязательно следует подписать маркером или карандашом по стеклу. Несмотря на то, что жидкости различаются по цвету, после смешивания с кровью это отличие становится не так очевидно, и есть риск запутаться.
  4. Капля крови не должна быть слишком большой или маленькой, идеальное соотношение крови и цоликлона 2:10 — 3:10. При слишком большом количестве эритроцитов реакция агглютинации может быть недостаточно заметной, а при недостатке она будет происходить очень медленно.
  5. Жидкости из двух исследуемых капель ни в коем случае не должны соприкасаться между собой. Если это все же произошло, нужно провести исследование заново.
  6. Если вы используете стеклянные палочки для смешивания крови и цоликлона, то они должны быть индивидуальными для каждой капли.
  7. Продолжительность наблюдения за реакцией агглютинации должна быть не менее 3 минут, а при возникающих сомнениях — все 5. Несмотря на то, что склеивание эритроцитов происходит уже в течение первых 10 секунд, не стоит делать поспешные выводы, увидев агглютинацию в одной из капель.

Продолжив наблюдение, вы можете, к своему удивлению, заметить замедленную реакцию и со вторым цоликлоном, если у исследуемой крови есть свои особенности. Однако по прошествии слишком большого времени может произойти подсыхание крови и естественное оседание эритроцитов, поэтому таким результатам доверять не стоит.

Планшет необходимо покачивать в течение всего периода наблюдения, в противном случае эритроциты могут оседать по краям капли, что ошибочно принимается за их агглютинацию.

Мнение эксперта

Ковалева Елена Анатольевна

Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.

Задать вопрос эксперту

Определение группы крови может быть затруднено при некоторых тяжелых заболеваниях, когда изменяются свойства эритроцитов. Так при болезнях печени и селезенки, сепсисе, пневмонии, ожогах эритроциты могут стать настолько склонными к агглютинации, что склеиваются даже в сыворотке крови или в физиологическом растворе (так называемая панагглютинация).

Напротив, при лейкозах происходит снижение агглютиногенных свойств эритроцитов, и они могут не вступать в реакцию даже при применении реагентов высокой активности, такое наблюдается также у новорожденных детей. У некоторых групп лиц, таких как близнецы и пациенты, перенесшие пересадку костного мозга или многочисленные переливания некорректно подобранной крови, возникает редкое явление, называемое кровяной химерой.

Это означает, что в их организме сосуществуют эритроциты, относящиеся к разным группам крови. Исследование крови таких людей представляет немалую сложность. Поэтому в случае неясного результата анализа кровь лучше подвергнуть более точному исследованию в условиях лаборатории.

Определение группы крови — важнейшее исследование, где от точности полученного результата зависит жизнь пациента. При переливании неправильно подобранной крови развиваются тяжелые осложнения от лихорадки до повреждения легких и летального исхода, ведь реакция агглютинации, наблюдаемая нами на планшете, произойдет непосредственно в организме реципиента.

Поэтому результаты экспресс-исследования с помощью цоликлонов, которое может быть произведено непосредственно при заборе крови в процедурном кабинете, требуют подтверждения лабораторными методами в специализированной лаборатории.

Мнение эксперта

Ковалева Елена Анатольевна

Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.

Задать вопрос эксперту

Помимо группы крови там определят резус-фактор, c-белок и другие антигены, позволяющие подобрать кровь для переливания максимально точно. Однако в случае, если показания для проведения анализа не столь серьезны, например, человек хочет знать результат для соблюдения диеты по группе крови, метода цоликлонов будет вполне достаточно.

Сегодня определение группы крови цоликлонами становится все более частым благодаря простоте и точности методики при правильном соблюдении алгоритма исследования. Если раньше такой анализ был доступен лишь в профильном стационаре, то теперь многие лаборатории отказываются от других, более сложных методов, в пользу цоликлонов.

При желании узнать свою группу крови вы можете сделать это в поликлинике по месту жительства с соответствующим направлением от терапевта либо в частном медицинском центре. Владея минимальными медицинскими навыками и имея в своем распоряжении цоликлоны, вы можете провести такое исследование и в домашних условиях, но в этом случае нужно особо строго отнестись к соблюдению правил асептики и антисептики.

загрузка...

Автор статьи

Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.

Написано статей

22

Отличная статья 0

Отправить ответ

avatar
  Подписаться  
Уведомление о